pPIC9K-His
| 目录号 | 规格 | 价格 | 是否现货 |
|---|---|---|---|
| YP1679 | 1ug | 698 | 是 |
质粒信息
质粒宿主：酵母菌
质粒用途：蛋白表达
片段类型：ORF
片段物种：空载体
原核抗性：Amp
筛选标记：HIS4,Neo/G418
启 动 子: AOX1
复 制 子: pUC
感 受 态: DH5a
温 度: 37度
正向引物: 5´ AOX：
反向引物: 3´ AOX：
诱导方式: 甲醇诱导
质粒介绍
pPIC9-His是一个鉴定多拷贝基因插入到毕赤酵母基因组中的载体。
1.pPIC9载体大小9294 bp，是融合表达载体。
2.载体构建过程中，可供使用的单一限制性内切酶位点为Xho I, SnaB I, EcoR I, Avr II, Not I.
3.利用alpha因子分泌信号肽，分泌表达蛋白基因。
4.在载体构建过程中，你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。
5.毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。
6.为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)
7.为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)
8.将基因插入GS115的AOX1区域，需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。
质粒图谱
质粒序列
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